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PCR测序试剂盒

产品描述:

1、PCR测序试剂盒(PCR Sequencing Kit)适用于当起始gDNA数量有限时的测序建库。
2、在Covaris g-TUBE 中将gDNA样本片段化。经剪切的末端通过NEBNext末端修复/ dA尾添加模块(NEBNext End Repair/dA-tailing module)进行修复和dA尾添加,再将含有引物结合位点的接头连接至制备好的末端上。之后进行扩增步骤,使用含由5’标签的引物以促进快速测序接头(Rapid Sequencing Adapter)的无连接酶贴附。
3、使用试剂盒需进行约50分钟的预PCR准备工作。PCR步骤各不相同(取决于循环数,聚合酶速度和模板长度)。标准步骤建议起始gDNA为100ng:可以使用更少量,但是可能需要增加PCR循环数。PCR后的步骤大概需要10分钟。

 适用客户:

1、DNA的起始量较低

2、希望优化通量测序实验

3、需要控制读长
4、对靶向扩增子测序感兴趣

进一步考虑:
1、除了用于生成更多的材料(在起始材料有限的情况下),PCR还可用于纯度不高的样本(不纯样本可抑制文库构建效率);PCR选择合适的分子作为为模板进行扩增。原始杂质丢失或稀释。在实验中可以经常看到,加入 PCR 步骤能够对产生较差测序结果的样本进行改善。在起始样本少于1ng的情况下,我们推荐进行全基因组扩增。

2、PCR后产生的片段长度取决于PCR中实用的输入物料长度,并受到DNA聚合酶持续合成能力的限制。这意味着,使用PCR测序试剂盒(PCR Sequencing Kit)可以获得更好的片段长度,相比之下,快速PCR条码试剂盒(Rapid PCR Barcoding Kit)只能达到~2 kb。因此,在起始物料有限(即需要使用PCR)但所需读长超过快速PCR条码试剂盒(Rapid PCR Barcoding Kit)所能达到的长度时,该试剂盒便可提供解决方案。

3、一个PCR条码试剂盒(PCR Barcoding Kit)可以对多达12个样本进行混样建库。


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